实验室安全实验操作规程（含应急措施和废弃物处理措施）
2022-04-14 15:51:42国家卫生健康委员会时间生物学重点实验室（四川大学）
国家卫生健康委员会时间生物学重点实验室
安全实验操作规程
（含应急措施和废弃物处理措施）
为保证实验工作的顺利展开，并为师生创造一个良好安全的实验环境，在本实验室操作者都必须遵守以下的安全操作程序：
1. 实验室内严禁奔跑打闹，以免发生意外；
2. 实验者在实验过程中如需就餐，请到办公室或休息区域，严禁在实验室内饮食，或把餐具带进实验室，更不能把实验器皿当作餐具；
3. 严格按照仪器操作规程，正确操作仪器；
4. 实验时若发现仪器设备出现故障或异常情况（如：有异味、冒烟等）时，应立即关闭电源开关，拨掉电源插头，并及时向实验室管理人员报告；遇到此类情况，实验者不得擅自处理、或不报告就擅自更换仪器，否则后果自负；
5. 使用实验室后，要关闭设备的电源、关好门窗、整理好仪器设备，并打扫卫生；
6. 实验者必须服从实验室工作人员的管理和安排，并严格执行以下各实验室的具体安全操作程序；如有违反，一经发现，按国家或学校相关条例进行处理并向有关领导报告，重者追究其法律责任。
一、分子实验室安全操作规程
在分子生物相关的实验中，许多药品具有一定的危险性，要么易燃易爆、要么有腐蚀性、要么具有毒性，所以更要求实验者在实验过程中严格规范操作，保护好自身安全。
1.实验前要熟悉每个实验步骤中的安全操作规定和注意事项。
2.酒精灯用完后应用灯帽熄灭，切忌用嘴吹灭。
3.使用易燃、易爆试剂一定要远离火源；点燃可燃气体前必须检查可燃气体的纯度。
4.要注意安全用电，不要用湿手、湿物接触电源，实验结束后应及时切断电源。
5.加热或倾倒液体时，切勿俯视容器，以防液滴飞溅造成伤害；给试管加热时，切勿将管口对着自己或他人，以免药品喷出伤人。
6.嗅闻气体时，应保持一定的距离，慢慢地用手把挥发出来的气体少量地煽向自己，不要俯向容器直接去嗅。
7.凡做有毒和有恶臭气体的实验，应在通风橱内进行。
8.取用药品要选用药匙等专用器具，不能用手直接拿取，防止药品接触皮肤造成伤害。
9.不允许将几种试剂或药品随意研磨或混合，以免发生爆炸灼伤等意外事故。
10.稀释浓酸（特别是浓硫酸），应把酸慢慢地注入水中，并不断搅拌，切不可将水注入酸内，以免溅出或爆炸。
11.使用玻璃仪器时，要按操作规程，轻拿轻放，以免破损，造成伤害，注意做到以下几点：
11.1 使用玻璃仪器前，先要检查有无破损，有破损的就不能使用。组装和拆卸实验装置时要防止仪器折断，不要使仪器勉强弯曲，应使之呈自然状态。玻璃仪器放在高处时，一定要用铁夹夹紧，保证安全。
11.2 玻璃仪器与胶管或胶塞连接时，最好用布包住玻璃仪器，一般左手拿被插入的仪器，右手拿插入的仪器，慢慢地按顺时针方向旋转插入（一定要朝一个方向旋转，勿使玻璃管口对着掌心）。插入前要先蘸些水或甘油。
12.使用打孔器或用小刀割胶塞、胶管等材料时，要谨慎操作，以防割伤。
二、细胞实验室安全操作规程
细胞实验室不同于其他实验室，要求在无菌条件下进行实验。所以，每位进行细胞实验的实验者都要求严格无菌操作，保持无微生物污染，以便实验能够顺利进行。
1.非实验人员未经允许不得进入细胞实验室。
2.凡进入细胞实验室的人员要有严格的无菌操作概念，任何人员初次使用细胞实验室必须完成本实验室入室培训和相关设备的使用培训，待完全掌握操作规定之后方可独立操作。
3.进出细胞实验室必须随手关门，将前一道门关闭后方可打开后一道门，尤其多人进入时特别注意。
4.实验者在进行实验前须熟悉实验内容、操作步骤及各类仪器的性能和操作方法，避免遗漏实验用品，严格执行操作规程，并做好必要的安全防护。
5.请在实验前30分钟预先打开超净台紫外灯照射，严禁长时间开着紫外灯，不可因贪图第二天早上实验方便而在头一天将紫外灯开着照射过夜。紫外开好后需开风机至少5min后方可上台操作。
6.细胞实验室中培养基、胰酶、血清等均分装后单独使用，并对自己实验物品需做好标记，包括物品名称、分装人、分装时间、未经同意不得擅自使用他人物品，避免交叉污染。不得擅自查看或取出他人培养的细胞或实验记录。细胞实验室内移液枪为专用，严禁将移液枪等带离细胞室。
7.严禁将与实验无关的物品、易燃、易爆及其他有毒有害物品带入细胞实验室。
8.实验过程中严禁喧哗、闲聊、反复进出细胞实验室。禁止在培养室吸烟、进餐。严禁带闲杂人等进入细胞实验室。
9.实验结束后，及时用75%酒精清理操作台面，整理好用过的实验器材，清理废弃物，倒空洗净废液缸，废弃物品带出操作间，实验区用紫外线照射30分钟，观察培养箱CO2的浓度，待正常后方可离开。
10.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。观察培养箱实际温度与所设温度是否相符。定期检查CO2气体量是否充足，不足时应及时通知细胞实验室管理员更换CO2钢瓶。密切注意培养箱内的增湿盘，定期更换无菌水并进行消毒。
11.水浴锅内需加无菌水，定期更换并进行消毒，注意使用完要注意关闭。
12.使用显微镜后应随手降低光源亮度，使用完毕注意关闭。
13.当天最后一个离开细胞实验室的实验者要认真检查各项设备是否有异常，将显微镜关闭，盖防尘罩，关掉电源，离心机和水浴锅这边的电源也要关闭。
14.实验者应爱护实验室各类仪器，按照规则使用并维持清洁；实验者必须按规定的主要仪器参数操作，未经许可不得随意改变设备仪器的技术参数；设备仪器出现故障或发生事故，应及时向实验室负责人报告。
15.进入细胞实验室的实验人员必须遵守清洁卫生值日安排。在确认无菌室无人后方可开紫外灯杀菌。
三、动物实验室安全操作规程
实验动物的使用应遵守国家相关法律规定，应明确使用实验动物的理由和目的，完善操作规程，避免或减轻因实验对动物造成的不适合痛苦，包括使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法，禁止不必要的重复操作。严格按程序实施实验后动物的处理，包括麻醉、止痛、实验后的护理或用麻醉方法处死，实验过程中要求保证实验动物的良好生活条件，包括饲养环境、符合需求的饲料及细心的护理等。实验者应接受实验动物的基本知识和操作技能等方面的培训，使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。
1.实验者和本实验室工作人员进入动物实验室，应着防护服，并保持动物实验室的整洁、安静；无关人员未经许可，不得进入。
2.实验者应爱护动物实验室的仪器设备，实验时如发生仪器设备故障或损坏等意外情况，应及时通告管理人员。
3.实验结束后应及时清理器械、药品和动物尸体；污物、垃圾倒入指定区域，严禁随地丢弃。
4.实验者向实验动物室借用动物笼器具等，应妥善保管，使用后及时清洁并归还。
5.严禁私自把外来动物带入动物实验室。
6.实验者在实验时要做好安全防护，谨防被实验动物咬伤、抓伤。
7.经常检查动物笼具设备是否良好，防止动物逃逸及其它事故的发生。
四、高压灭菌安全操作规程
在使用高压灭菌前，应充分了解并掌握高压锅的原理及操作规则，以及不正确使用而导致的灾难性后果。实验者应按照操作规程使用高压灭菌锅。
1.在灭菌前将双层的高压灭菌带包好，废物在灭菌袋中的体积不能超过袋子体积的3/4，灭菌袋用橡皮带捆好，但不能扎得太死，否则蒸汽不能进入所料袋内影响灭菌效果。
2.实验产生的所有废物应该及时就地灭菌处理。如果灭菌器正在使用或优于其它原因不能马上使用，则废物必须放在灭菌袋内捆好并放在实验室内，在存放期间确保袋子无损坏。
3.当高压锅消毒灭菌盗时间后，取出物品放在废物收集处。
4.当开始灭菌时必须确信灭菌国内水量合适，高压温度和时间设置正确。灭菌应保持在121℃30分钟，时间和温度不得超过设定值，否则灭菌袋会融化，清理困难。
5.定期检查高压锅，以确保其正常工作，防止意外事故发生，保证消毒灭局效果。
应急措施
本实验室可能存在和发生的安全事故有：火灾、爆炸、中毒、烧伤、触电、动物咬伤和抓伤等。
1.火灾
1.1发生原因
1.1.1 点燃的酒精灯碰翻或使用不当。
1.1.2 可燃物质如酒精、乙醚等因接触火焰或处在较高温度下着火燃烧。
1.1.3 能自燃的物质如白磷等由于接触空气或长时间氧化作用而燃烧。
1.1.4 化学反应引起的燃烧或爆炸。
1.1.5 忘记关电源，致使设备或用电器具通电时间过长，温度过高，引起着火。
1.1.6 乱扔烟头，接触易燃物质，引起着火。
1.2预防措施
1.2.1 易燃物和强氧化剂分开放置。
1.2.2 进行加热或燃烧试验时，要求严格遵守操作规程。
1.2.3 使用易挥发的可燃物质，实验装置要严密不漏气，严禁在燃烧的火焰附近转移或添加易燃溶剂。
1.2.4 可燃废物如浸过可燃性液体的滤纸、棉花等，不得倒入废物箱内，及时在露天烧去。不得把燃着的或带有火星的火柴梗投入废物箱内。
1.2.5 实验室内严禁吸烟。
1.2.6 实验室内经常备有灭火器等防火器材。
1.2.7 实验结束离开实验室前，仔细检查酒精灯是否熄灭，电源是否关闭。
1.3实验室发生电器火灾时，应采取以下措施：
1.3.1 为防止火势扩散及蔓延，必须首先切断电器总电源、气源开关，迅速移走周围的可燃物品，关闭一切通风装置，减少空气流通。
1.3.2 设法隔绝火源周围的空气，降低温度至低于可燃物的着火点。根据火势的大小采取有效措施及时扑灭火焰。火势较小时，可用湿抹布等灭火。对于大火，则应根据可燃物的性质使用不同方法和灭火器灭火。
1.3.3 当实验室发生大火又没有及时补救，致使火势蔓延扩大而无法扑灭时，应立即拨打火警“119”报警，同时向领导汇报，组织人员尽快撤离现场。
1.4实验室气瓶爆炸引起火灾时，应采取以下措施：
1.4.1 首先切断气源电源，迅速移走那些可能使火势扩大、有爆炸危险的物质，如充有气体的钢瓶及其他易燃易爆和有毒物质。
1.4.2 设法隔绝火源周围的空气，并快速使用灭火器灭火。
1.4.3 当发生爆炸火灾又没有及时补救，致使火势蔓延扩大而无法扑灭时，应立即拨打火警“119”报警，同时向领导汇报，组织人员尽快撤离现场。
1.5火灾应急疏散程序：
1.5.1 火灾发生后，实验室负责人应立即赶到火情发生现场，协助组织人员顺序疏散。
1.5.2 疏散顺序：着火层人员——着火层楼上人员——着火层楼下人员。
1.5.3 疏散方向：一般情况下应该按照疏散指示灯和安全出口灯指示的方向进行疏散。若安全指示灯方向和火灾方向相同，则向相反方向疏散。
2.爆炸
2.1发生原因
2.1.1 仪器装置错误，在加热过程中形成密闭系统，或操作大意，冷水流入灼热的容器。
2.1.2 气体通路发生堵塞故障。
2.1.3 在密闭容器里加热易挥发的有机溶剂，如乙醚。
2.1.4 减压试验时使用薄壁玻璃容器，或造成压力突变。
2.1.5 设备老化，存在故障或缺陷，造成易燃易爆物品泄露，遇火花而引起爆炸。
2.2预防措施
2.2.1 蒸馏时，仪器系统不可完全密闭。使用气体时，应严防气体发生器或导气管堵塞。
2.2.2 在减压蒸馏时，不可用平底或薄壁烧瓶，所用橡皮塞也不宜太小，否则易被抽入瓶内或冷凝器内，造成压力的突然变化而引起爆炸。
2.2.3 操作完毕后，应待瓶内液体冷却到室温，小心放入空气后，再拆除仪器。
2.2.4 对在反应过程中估计会有爆炸危险的，则使用防护屏和护目镜。
3.中毒
3.1发生原因
3.1.1 接触了有毒物质或吸入有毒气体。
3.1.2 对有些试剂的性质了解不够，处理不当。
3.1.3制备有毒气体的装置不合理或操作不熟练。
3.1.4 违反操作规程，将食物带进有毒物的实验室，造成误食中毒。
3.1.5 设备老化，存在故障或缺陷，造成有毒物质泄漏或有毒气体排放不出，酿成中毒。
3.1.6 管理不善，造成有毒物品散落流失，引起环境污染。
3.2预防措施
3.2.1 购买有毒化学品必须先履行相关的审批手续，具备合适的存放地点，并有专人保管。
3.2.2 一切能产生有毒气体的实验，必须在通风橱内进行。必要时戴上防毒口罩或防毒面具。
3.2.3 有毒药品应严格按操作规程和规定的限量使用。
3.2.4 使用气体吸收剂来防止有毒气体污染空气。
3.2.5 有毒的废物、废液经过处理后再排放。
3.2.6 禁止在实验室内饮食或利用实验器具贮存食品，餐具不能带进实验室。
3.2.7 手上如沾到药品，应用肥皂盒冷水洗除，不宜用热水洗，也不可用有机溶剂洗手。
3.2.8 皮肤上有破伤，不能接触有毒物质。
3.2.9 实验室经常注意通风，即使在冬季，也适时通风。
3.3急救方法
3.3.1 误吞毒物，常用的急救方法时给中毒者先服用催吐剂，如肥皂水、芥末和水或给以面粉和水，鸡蛋白、牛奶和食用油等缓和刺激，然后用手指伸入喉部引起呕吐。对磷中毒的人不能喝牛奶，可用5—10毫升1%的硫酸铜溶液加入一杯温水内服，以促使呕吐，然后送医院治疗。
3.3.2 有毒物质落在皮肤上，要立即用棉花或纱布擦掉，除白磷烧伤外，其余的均可以用大量水冲洗。如果皮肤已有破伤或毒物落入眼睛内，经水冲洗后，要立即送医院治疗。
4.烧伤
4.1发生原因：烧伤是由灼热的液体、固体、气体、化学物质或电热等引起的损伤；
4.2烧伤的伤势一般是按烧伤深度不同分为三度，烧伤的急救办法应根据各度伤势分别处理。为了预防烧伤，实验时严防过热的物体与身体任何部分接触；
4.2.1 一度烧伤：只损伤表皮，皮肤呈红斑，微痛，微肿，无水炮，感觉过敏，如被化学药品烧伤，应立即用大量水冲洗，除去残留在创面上的化学物质，并用冷水浸沐伤处，以减轻疼痛，最后用1:1000“新洁尔灭”消毒，保护创面不受感染；
4.2.2 二度烧伤：损伤表皮及真皮层，皮肤起水泡，疼痛，水肿明显。创面如污染严重，先用清水或生理盐水冲洗，再以1:1000“新洁尔灭”消毒，不要挑破水泡，用消毒纱布轻轻包扎好，请医生治疗；
4.2.3 三度烧伤：损伤皮肤全层、皮下组织，肌肉、骨骼，创面呈灰白色或焦黄色，无水泡，不痛，感觉消失。在送医院前，主要防止感染和休克，可用消毒纱布轻轻包扎好，给伤者保暖，必要时注射吗啡止痛；
5.触电
5.1发生原因：违反操作规程，乱拉电线等。因设备设施老化而存在故障和缺陷，造成漏电触电；
5.2触电应急处理预案：
5.2.1 触电急救的原则是在现场采取积极措施保护伤员生命；
5.2.2 触电者迅速脱离电源，越快越好，触电者未脱离电源前，救护人员不准用手直接触及伤员。使伤者脱离电源方法：（1）切断电源开关；（2）若电源开关较远，可用干燥的木棍或竹竿挑开触电者身上的电线或带电设备；（3）可用几层干燥的衣服将手包住，或者站在干燥的木板上，拉触电者的衣服，使其脱离电源；
5.2.3 触电者脱离电源后，应视其神志是否清醒，神志清醒者，应使其就地躺平，严密观察，暂时不要站立或走动；如神志不清，应就地仰面躺平，且确保气道通畅，并于5秒时间间隔呼叫伤员或轻拍其肩膀，以判定伤员是否意识丧失。禁止摇动伤员头部呼叫伤员。
6.动物咬伤和抓伤
6.1发生原因：实验者未穿戴防护用具，没有将实验动物固定好而使动物挣脱了，操作粗暴而引起动物的强烈反抗，麻药未充分起效就开始操作等。
6.2预防措施：
6.2.1 实验中采取适当的防护措施，如：穿戴防护手套等。
6.2.2 严格按照正规的操作手法，不要激怒动物。
6.2.3 操作时要将动物固定好，防止动物挣脱，必要时需要进行麻醉。
6.3急救措施：
6.3.1 受伤者应尽快用20%的肥皂水彻底清洗伤口，再用大量清水冲洗，清洗和冲洗时间不少于20分钟。
6.3.2 然后用2%至5%碘酒或75%酒精涂擦伤口，以清除或杀灭局部的病毒。
6.3.3 到医院处理伤口。
6.3.4 接种破伤风疫苗和狂犬病疫苗。
7.一般伤害的救护措施：实验室里备有救护药箱，在实验室的固定处放置。
7.1被强酸腐蚀：立即用大量清水冲洗，再用碳酸钠或碳酸氢钠溶液冲洗。
7.2被强碱腐蚀：立即用大量清水冲洗，再用醋酸溶液或硼酸溶液冲洗。
7.3刺伤、切割伤或擦伤：停止操作，保持镇静，用清水和肥皂水清洗伤口（若伤口里有碎玻璃片，应先用消过毒的镊子取出来），尽量挤出伤口处的血液，用适当的消毒液消毒皮肤，适当的包扎，并及时就医。
废弃物处理措施
为了保证实验室废弃物能被有效、安全地处置，防止浪费或对环境造成二次污染，本实验室在实验过程中所产生的废弃物均按照学校规定进行处理。
1.固体废弃物用专门的垃圾袋装好，扎紧袋口，置于专门的废弃物回收处。
2.液体废弃物则收集于废液缸中，统一回收。
3.实验动物废弃物和尸体的处理
3.1 血液和体液标本的处理：用于抗体、抗原、生化指标等检查的血液和体液，按照要求进行处理并检测，检测后的标本经121℃ 30min高压消毒处理。
3.2 动物脏器组织的处理：动物器官组织，用于病例切片的组织，均需要经过甲醛固定后再进行切片，剩余的组织经121℃ 30min高压消毒处理。
3.3 动物尸体的处理：安乐处死后的动物尸体，取材完毕后，经由专人集中处理。
4.下列废液不能互相混合：
4.1 过氧化物与有机物；氰化物、硫化物、次氯酸盐与酸；盐酸、氢氟酸等挥发性酸与不挥发性酸；浓硫酸、磺酸、羟基酸、聚磷酸等酸类与其它的酸；铵盐、挥发性胺与碱。
4.2 对硫醇、胺等会发出臭味的废液和会发生氰、磷化氢等有毒气体的废液，以及易燃性大的二硫化碳、乙醚之类废液，要把它加以适当的处理，防止泄漏，并应尽快进行处理。
4.3 含有过氧化物、硝化甘油之类爆炸性物质的废液，要谨慎地操作，并应尽快处理。
4.4 沾附有有害物质的滤纸、包药纸、棉纸、废活性炭及塑料容器等东西，不要丢入垃圾箱内。要分类收集，加以焚烧或其它适当的处理。
4.5 处理废液时，为了节约处理所用的药品，可将废铬酸混合液用于分解有机物，以及将废酸、废碱互相中和。要积极考虑废液的利用。
5.对酸、碱、盐类废液，原则上应将其分别收集。但如果没有妨碍，可将其互相中和，或用其处理其它的废液。对其稀溶液，用大量水把它稀释到1％以下的浓度后，即可排放。
